组培技巧篇培养基母液配置
治疗白癜风的专科医院 http://www.bdfyy999.com/index.html组培技巧篇培养基母液配置任何一个组培室都会定期配置一批培养基母液,培养基母液是组培中用量最多的东西,它占了原料成本的一大部分。什么是培养基母液培养基母液是什么,很多时候听得多但没见过配置,其实培养基母液就是植物的元素营养浓缩液,其实和我们常说的化肥比较类似,里面最主要的就是氮磷钾三元素,外加一些微量元素如铁、钙、铜等等。母液的意思就是浓缩液,使用的时候需要稀释使用,配置母液的目的就是为了方便,配置一次可以稀释使用很多次。具体来说培养基母液的种类很多,主要看培养基的种类,比较常见的有MS和N6两种,各种培养基间区别主要还是里面元素的含量不同,他们都会有一份元素含量表,我们只需按照表的量傻瓜式配置就行。补充下:母液是可以购买的,淘宝上都有,使用方法也有,但是价格较高,其实不嫌麻烦还是推荐大家自己配置。教学开始今天主要教大家配置的是MS培养基的母液先给大家一份兰花培养基的配方单,让大家有个直观的了解。1/2MS+糖25g/l+活性炭0.5g/l+琼脂5g/l+激素(6BA2mg/l+NAA0.1mg/l)+香蕉5%PH5.8上面便是我们常用的兰花培养基的所有组分,同时上面配置的是1L量的培养基,如果配更多需要乘上相应的倍数。同时我们很多时候会看到1/2MS或1/4MS这种,这里1/2和1/4的意思是营养液中大量元素的成分为原本的1/2或1/4。先看看组成下面我们看看一个MS的营养液的组成主要包括4个部分:1.大量元素2.微量元素3.铁盐4.有机元素PS:我们总共要配置4瓶母液,各部分配1瓶,每瓶1升a.大量元素配置先看看大量元素的组成大量元素使用量是最多的,配置次数也是最多的总共包括5种成分,它的浓缩倍数是10倍,也就是说1升的培养基需要加入的大量元素母液是ml,如果我们见到像1/2MS和1/4MS这种,那么大量元素母液就要相应减少,1/2MS加50ml,1/4MS加25ml。那么说下怎么配置:1.按上面称取量进行称取,先称编号1和2,称好后各放1个杯子里,再称3和4,称好后将3和4都放到2号的杯子里,最后称5号,然后将5号单独放到一个杯子里;解释一下:1号硝酸钾量较多,且溶解起来并不快,因此要单独放一个杯子来单独溶解。2号硝酸铵是极容易溶于水的,因此可以和3号和4号放一起溶解。5号氯化钙是比较难溶于水的,同时该药剂和其他药品放在一起溶解会发生反应形成沉淀,因此要单独溶解,同时购买氯化钙时要注意买2水的,如果买到无水氯化钙那么要加的量应该是3.3g。2.溶解刚才3个杯子,每个杯子大约加ml的蒸馏水(一定要是蒸馏水,可以直接买瓶装水,如怡宝的蒸馏水),用筷子或玻璃棒搅拌,使里面的东西全部溶解,看不到颗粒为止,有些颗粒比较大可以用玻璃棒适当的压碎。3.定容一般来说,母液要求精度比较高,所以大家最好买定容瓶来定容,不要用量筒,定容瓶长下面这个样的,我们使用1L装的,使用方法找百度,这里就不说了。将三杯溶液都倒到1L的定容瓶里,倒蒸馏水到3个杯子里,摇一摇,把杯子里剩余的溶液都过到定容瓶里,这样重复操作3次,每次过水不要太多,防止超量(我们总容量就0ml),过完水后就是定容了,直接倒水到定容瓶里,直到到定容的那条线,最好不要超,快到时,用滴管慢慢滴。b.微量元素配置微量元素,我个人推荐配置0倍浓缩的,因为各种药品使用的含量很低,配置倍数低的话,需要较高精度的天平,而且操作难度较大,配置0倍的,可以使用小数点到后2位的天平。具体配置如下:1.1号药品称好后单独放到1个杯子里,量较多溶解时间会长;2、3、4、5这四种药品分别称好后可以放到一个杯子里溶解,他们量都很少可以很快溶解完;6号和7号是单独溶解的,分开称好后,各放一个杯溶解即可。2.后面定容步骤和大量元素的操作方法是一样的,就不具体写了。c.铁盐母液的配置铁盐我们使用的倍数是杯,如果倍数过高,药品是无法全部溶解到水里的,倍数低的话使用速度会加快,倍是铁盐母液较常用的倍数。铁盐操作与另外3种母液不同,溶液必须加热,药品才会溶解具体操作如下:1.1号和2号药品分别称好,分别放到两个不同的杯子(这两种放到一起溶解是会发生化学反应的),分别加入沸水来进行溶解,或者加入冷水后放到微波炉加热溶解,我个人推荐前者的方法。2.两种药品完全溶解后,可以都倒到定容瓶定容,定容使用冷的蒸馏水即可。定容方法与前面大量元素操作方法一样。d.有机母液的配置有机母液比较简单,5号肌醇单独溶解外,1到4号药品可以放到一起溶解,后面定容方法一样。配培养基时母液的使用方法表格中最后一栏有配置1L培养基使用的母液量,按表格的量加入就行,如果配2升,每种母液就加1倍加入,配5升就加5倍的量。详细使用方法在后面配培养基时教大家。最后,如果大家觉得麻烦,可以直接上淘宝买现成的MS培养基干粉,回来按照他的使用量加水溶解即可,淘宝上还可以买到1/2MS和1/4MS。Ps:大家要配置1/2MS的培养基是一定要直接买1/2MS的干粉来用,而不是用MS的干粉减半来使用,原因上面有说。最后,如果大家觉得麻烦,可以直接上淘宝买现成的MS培养基干粉,回来按照他的使用量加水溶解即可,淘宝上还可以买到1/2MS和1/4MS。Ps:大家要配置1/2MS的培养基是一定要直接买1/2MS的干粉来用,而不是用MS的干粉减半来使用,原因上面有说。这章有点长,比较有点专业性,不懂的朋友可问直接加我私人 |
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